|
|
Molekulární interakce vyvíjejících se axonů s povrchovým ektodermem
Matějček, Miroslav ; Machoň, Ondřej (vedoucí práce) ; Rozbeský, Daniel (oponent)
Kraniální nervy jsou komplexem skládajícím se z dvanácti párových nervů, které svými nervovými zakončeními propojují orgány hlavy s centrální nervovou soustavou. Jedněmi z takto inervovaných orgánů jsou smyslové vousky (neboli také vibrisy), které jsou inervovány axony infraorbitálního oblouku trigeminálního nervu. Smyslové vousky jsou speciálním typem ochlupení savců sloužícím k orientaci v terénu, lokalizaci kořisti a lokomoci. Dlouhou dobu se diskutuje o potenciální roli axonů v iniciaci vzniku smyslových vousků, avšak tato hypotéza nebyla nikdy potvrzena. V naší práci jsme výzkum prováděli na myších kmenech Neurog1 KO a Meis2 cKO, které mají chybný vývoj trigeminálního nervu, nebo jim trigeminální nerv zcela chybí. Díky analýze jejich embryonálního vývoje jsme vyvrátili hypotézu, že axony trigeminálního nervu iniciují vznik folikulů smyslových vousků. U embryí Meis2 cKO jsme pozorovali poruchu tvorby folikulů smyslových vousků. Exprese genu Meis2 v průběhu vývoje smyslových vousků ovlivňuje signální kaskády Fgf, Shh a Bmp. V důsledku změn v aktivitě těchto kaskád předpokládáme, že dochází k zastavení vývoje smyslových vousků mezi prvním dermálním a prvním epidermálním signálem.
|
|
|
Role of transcription factors Meis during embryogenesis Danio rerio
Brežinová, Veronika ; Machoň, Ondřej (vedoucí práce) ; Krylov, Vladimír (oponent)
Meis transkripčné faktory patria do skupiny TALE (predĺženie troch aminokyselinových slučiek) homeodoménových proteínov. Meis2 proteíny pravdepodobne zohrávajú regulačnú funkciu v priebehu vývoja buniek neurálnej lišty a diferenciácie jej derivátov. V genóme zebričky sú kódované dvoma paralógnymi génmi meis2a a meis2b. CRISPR/Cas9 technológia bola využitá k príprave mutantných línií pre oba paralógy meis2a a meis2b, za účelom študovania funkcie tohto transkripčného faktora. Súčasne ako kontrola boli použité špecifické Morfolína pre meis2a aj meis2b, ktoré znižujú expresiu týchto génov. Kraniofaciálny a srdečný vývoj bol u mutantných rýb analyzovaný u línie meis2a pomocou RNA in situ hybridizácie, histologického farbenia chrupaviek a počítačovou tomografiou. Zatiaľ čo, po injikácií špecifických Morfolín sme pozorovali narušený kraniofaciálny vývoj aj vývoj srdca, u línie meis2a KO sme tieto typické zmeny neodhalili. Náš genetický prístup jasne nepreukázal, že samotný meis2a paralóg zohráva dôležitú úlohu v kraniofaciálnom vývoji a pri vývoji srdca. Pre podrobnejšiu analýzu sú potrebné ďalšie experimenty na líniách rýb s kombinovanými knock-outami meis2a aj meis2b. Kľúčové slová Mutagenéza CRISPR, Danio rerio, bunky neurálnej lišty, Meis2, transkripčný faktor
|
host ::
RSS.